蜂浆中葵烯酸检测分析液相色谱仪lLC-3000二元高压梯度

 蜂浆是世界上的可供直接服用的高成分的营养食品。 10- 羟基-2- 癸烯酸(10-HDA)是蜂浆有的一种不饱和脂肪酸，由于这种酸在自然界的其它物质中没有，只存在于蜂浆中，所以也称浆酸。分离出的纯浆酸呈白色晶体，在新鲜的蜂浆中多以游离形式存在，性质比较稳定，具有很好的、抑菌、疲劳、衰老作用和、放射的功能，为此许多保健食品均添加有蜂浆。因此作为评价蜂浆及其制品质量优劣的主要指标之一的10-HDA 含量测定显得尤其重要。至今为止，10-HDA 含量测定有薄层扫描法、分光光度法、气相法、液相法，且多见于分析蜂浆中的10-HDA 。薄层扫描法、分光光度法专属性和准确性较差，气相法处理繁琐，目前为通用的是H P L C法。液相法处理简单、结果准确，本公司基于以上情况，建立了声提取、冷藏沉淀后，用对羧基甲酸乙酯做内标，反相液相色谱法测定蜂浆及其制品中1 0 -H D A 含量的方法，取得了令人满意的结果。

一、主要性能特点:   

1）、蜂浆中葵烯酸检测分析液相色谱仪LC-3000C整套系统由P3000高压输液泵（二元梯度）、UV3000分光检测器、分析型动态高压混合器、进样阀、溶剂托盘、色谱柱、反控色谱工作站软件等组成；安装、调试及使用都简单。 
2）、P3000高压输液泵是以CPLD技术为，由单片机控制的输液泵系统。全数字频率发生系统，的马达驱动系统友好的人机显示界面使操作很方便，的泵头及单项阀设计思路，融汇了当今世界上的经验，使该系统在各种条件下输液的及重复性。  

3）、UV3000是一种分光检测器，可以匹配任何输液泵，适用于化学分析、农、制、化工等领域有着广泛的应用。采用了全数字、高集成化设计理念，大大降低仪器的噪声；基于数字信号传输和处理，该检测器的信号可直接输入到计算机的串行口进行采集，甩掉了传统仪器须使用的数据采集卡！
   二、仪器主要配置和检测分析条件：

(1). 主要仪器配置：
1、LC-3000液相色谱仪；2、色谱柱：C18，250*4.6*10 或250*4.6*5
3、离心机（大于4500r/min；50ml）4、声波震荡仪；5、涡旋混合器；
6、分析天平（一）；7、溶剂过滤器（带0.45um、水系过滤膜和真空泵）；
（2）、主要试剂：

1.纯净水（二次蒸馏水）  2.甲醇：分析醇 3.乙醇：优级纯   4.内标物：对羟基甲酸甲酯含量99.0%   5.10-HAD标准品：99.0%以上。使用前应在放有浓的减压干燥器内减压干燥24h 6.10-HAD标准溶液：取干燥后的10-HAD标准品约25mg，精密称定，加无水乙醇溶解并移入1000ml容量瓶中，用无水乙醇稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含内标物约0.65mg。7.（C=0.03mol/L）：量取0.1mol/L100ml，加入200ml重蒸馏水中。

（3）.色谱条件：
色谱柱为Kromasil C18 柱，流动相为V(甲醇):V(水):V(磷酸)=55:45:0.2，流速1.0ml/min，对羧基甲酸乙酯作内标，检测波长210nm。本法简单、快速、准确，重现性好，回收率高(97.6%～101.8%)。

（4）.样品处理

样品解冻至室温后用玻璃棒搅匀，取约0.5g，置于已称定的50ml容量瓶中，精密称定，加0.03mol/L1ml和水2ml，置漩涡混合器上混合使样品溶解，加无水乙醇30ml，边加边轻轻摇动，再精密加入内标溶液10ml，并用无水乙醇稀释至刻度，摇匀，立即置声波中声15min，或置漩涡混合器上振荡15min，取出，在3000r/min下离心10min后测定。如不能及时测定，应放置在冰箱中冷藏待测。