本试剂盒采用双体夹心ELISA法。用人ProBNP 单包被于酶标板上,实验时标本或标准品中的ProBNP 会与单结合,游离的成分被洗去。依次加入生物素化的人ProBNP 体和辣根过氧化物酶标记的亲和素。人ProBNP 体与结合在单上的人ProBNP 结合、生物素与亲和素特异性结合而形成免疫复合物,游离的成分被洗去。加入显色底物,T在辣根过氧化物酶的催化下现蓝色,加终止液后变黄。用酶标仪在450nm波长处测OD值,ProBNP 浓度与OD450值之间呈正比,通过绘制标准曲线求出标本中ProBNP 的浓度。