猪口蹄疫VP1结构蛋白检测试剂盒(酶联免疫法)
【产品名称】
通用名:猪口蹄疫VP1结构蛋白检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名:Test Kit for Antibodies to Porcine Foot and Mouth Disease Virus O (ELISA)
【包装规格】 96T×1/盒、96T×2/盒、96T×5/盒
【预期用途】 口蹄疫是由口蹄疫(Foot and Mouth Disease Virus,FMDV)引起的偶蹄动物的一种急性、热性、高度接触性,其特征为口腔黏膜、蹄部、乳房皮肤发生水泡和烂斑。
猪口蹄疫VP1结构蛋白检测试剂盒用于检测猪血清中口蹄疫O型体,可用于口蹄疫O型疫苗免疫效果评价。
【原 理】
猪口蹄疫VP1结构蛋白检测试剂盒系由预包被口蹄疫O型VP1原的酶标板、酶标记物及其他配套试剂组成,应用酶联免疫法(ELISA)原理检测猪血清、血浆样本中猪口蹄疫O型体。实验时在酶标板中加入对照血清和待检样本,经温育后若样品中含有猪口蹄疫O型体,则将与酶标板上原结合,经洗涤除去未结合的其他成分后;再加入酶标记物,与酶标板上原体复合物发生特异性结合;再经洗涤除去未结合的酶标记物,在孔中加T底物液,与酶反应形成蓝色产物,显色深浅与样品中的特异性体含量成正相关;加入终止液终止反应后,产物变为黄色;用酶标仪在450nm波长测定各反应孔中的吸光值,即可知样品是否含有口蹄疫O型体。
【猪口蹄疫VP1结构蛋白检测试剂盒组成】
1. 酶标板
2. 酶标记物
3. 样品稀释液
4. 浓缩洗涤液
5. 底物液A
6. 底物液B
7. 终止液
8. 阳性对照
9. 阴性对照
10. 盖板膜
11. 自封袋
12. 说明书
13. 稀释板
【储存及期】 于2~8℃避光保存,期为12个月。
包被板开封后请于2~8℃避光保存,避免受潮。使用期限为2个月。
【适用仪器】 含450nm、630nm波长的酶标仪,37℃恒温设备,可调微量移液器。
【样品准备】
1.取动物全血按常规方法制备血清,要求血清清亮,无溶血、无污染。样品1周内可于2~8℃保存,长期需置-20℃保存。
2.用样品稀释液将待检血清按40倍稀释(如5μl血清加入195μl样品稀释液中,混匀)。阴、阳性对照不用稀释。
3.浓缩洗涤液使用前应恢复至室温使沉淀溶解,然后用蒸馏水或去离子水作20倍稀释成工作洗涤液。
【参考值】 实验正常的情况下,阴性对照≤0.10,阳性对照≥0.6。
【检验结果的解释】
1.样品A值≥0.38为阳性;样品A值在0.2到0.38之间为可疑;样品A值<0.2为阴性。
2.本实验结果为阴性或可疑时表明猪只体水平不足,建议补打相应疫苗。
【试验方法的局限性】
猪口蹄疫VP1结构蛋白检测试剂盒作为定性检测猪血清、血浆中猪口蹄疫O型体,根据A值高低可作体水平强、中、弱的粗略评估。
【注意事项】
1.实验操作时需戴手套、穿工作衣,严格健全和执行隔离制度,各种实验废弃物都应按传染物处理。
2.终止液具有腐蚀性,应避免接触皮肤和衣物,如不慎接触请立即用大量自来水冲洗。
3.酶标板从冷藏环境中取出时应恢复至室温方可开袋,未用完的酶标板需放入有干燥剂的密封袋中保存。
4.浓缩洗涤液在低温时容易结晶,使用时需恢复至室温以溶解。
5.洗涤时各孔均需加满液体,孔口有游离酶不能洗净。
6.用于检测的样品应保持新鲜。
7.试验结果的判定须以酶标仪读数为准。
8.不同批号试剂组分不得混用。